Аналитические ферментативные реакции в микрофлюидных чипах

Перевод названия: Analytical Enzymatic Reactions in Microfluidic Systems

Тип публикации: статья из журнала

Год издания: 2016

Идентификатор DOI: 10.1016/0234-2758-2016-32-5-69-76

Ключевые слова: биолюминесценция, люцифераза, микрофлюидика, микрофлюидный чип, ферментативное биотестирование, bioluminescence, enzymatic bioassay, luciferase, microfluidics, Microfluidic system

Аннотация: Предложен и апробирован ряд подходов, позволяющих осуществить перенос энзиматических реакций в функциональные элементы микрофлюидных чипов на примере биферментной биолюминесцентной реакции с участием ферментов NAD(P)H:FMN-оксидоредуктазы и люциферазы. Измерение каталитической активности этих ферментов (под влиянием загрязняющих веществ) является основой метода ферментативного биотестирования различных жидкостей. Было установлено, что для повышения воспроизводимости измерений все компоненты реакции необходимо размещать в одной камере чипа. Использование крахмального геля в качестве носителя для иммобилизации и подложки из желатина в реакторе чипа позволяет сохранять активность ферментов в ходе герметизации чипов при комнатной температуре. Показано, что для повышения эффективности анализа компоненты реакции необходимо активно перемешивать в реакторе микрофлюидного чипа. По результатам проведенных исследований предложен прототип микрофлюидного чипа на основе ферментативной биолюминесцентной реакции, который характеризуется пределом обнаружения сульфата меди 3 мкМ, что соответствует чувствительности традиционных lux-биосенсоров на основе живых клеток. При этом время анализа сокращается до 1 мин, а сам анализ может быть выполнен лицами, не имеющими специальных лабораторных навыков.

Ссылки на полный текст

Издание

Журнал: Биотехнология

Выпуск журнала: Т.32, 5

Номера страниц: 69-76

ISSN журнала: 02342758

Место издания: Москва

Издатель: Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов"

Авторы

  • Лукьяненко К.А. (Сибирский федеральный университет)
  • Белобров П.И. (Институт биофизики, Сибирское отделение Российской академии наук)
  • Денисов И.А. (Сибирский федеральный университет)
  • Якимов А.С. (Сибирский федеральный университет)
  • Есимбекова Е.Н. (Институт биофизики, Сибирское отделение Российской академии наук)
  • Белоусов К.И. (Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики)
  • Букатин А.С. (Сибирский федеральный университет)
  • Кухтевич И.В. (Сибирский федеральный университет)
  • Сорокин В.В. (Сибирский федеральный университет)
  • Евстрапов А.А. (Институт аналитического приборостроения Российской академии наук)

Вхождение в базы данных

Информация о публикациях загружается с сайта службы поддержки публикационной активности СФУ. Сообщите, если заметили неточности.

Вы можете отметить интересные фрагменты текста, которые будут доступны по уникальной ссылке в адресной строке браузера.