Функция белка в конверсии энергии химических связей в свет Ca2+-активируемыми люциферазами

Перевод названия: The protein moiety function in chemical bonds' energy conversion into light by Ca2+- activated luciferases

Тип публикации: отчёт о НИР

Год издания: 1996

Аннотация: Методом олигонуклеотид-направленного мутагенеза получены мутантные варианты обелина с заменой аспарагиновой и глутаминовой кислот на аланин и глицин соответственно в 11 и 12 положениях во II, III и I+II Ca2+- связывающих доменах обелина. Для мутантных вариантов обелина с заменами во II и III Ca2+-связывающих сайтах исследована кинетика люминесцентного ответа и определена чувствительность к ионам кальция; для мутанта с заменами в I и II Ca2+-связывающих доменах - исследована чувствительность к ионам кальция. Проведенные аминокислотные замены вызывают изменения: а) чувствительности мутантных вариантов обелина к кальцию; б) наклона кривой зависимости интенсивности люминесценции от концентрации кальция; в) кинетики люминесцентного сигнала. Mg2+ в концентрации 10 мМ, как правило, уменьшает амплитуду люминесцентного ответа и изменяет его характер, а также сдвигает кривую зависимости интенсивности люминесценции от [Ca2+] в область более высоких концентраций кальция. Используя диэтилпирокарбонат (DEPC) для селективной модификации гистидина, определено количество "доступных" аминокислотных остатков в молекуле апообелина и фотопротеиновом комплексе: апообелин-целентеразин-О2, а также исследовано влияние этих модификаций на способность апобелка образовывать активный комплекс и на способность фотопротеинового комплекса к люминесценции. Из пяти гистидиновых остатков обелина в апобелке DEPC модифицируется только один. После модификации апобелок практически полностью теряет способность к образованию фотопротеинового комплекса. Образование активного комплекса апообелин-целентеразин-О2, т.е. связывание субстратов с белком, защищает от модификации гистидиновый остаток.

Ссылки на полный текст

Авторы

  • Высоцкий Е.С. (Институт биофизики СО РАН (ИБФ СО РАН))
  • Бондарь В.С. (Институт биофизики СО РАН (ИБФ СО РАН))
  • Илларионов Б.А. (Институт биофизики СО РАН (ИБФ СО РАН))
  • Илларионова В.А. (Институт биофизики СО РАН (ИБФ СО РАН))
  • Франк Л.А. (Институт биофизики СО РАН (ИБФ СО РАН))

Вхождение в базы данных

Информация о публикациях загружается с сайта службы поддержки публикационной активности СФУ. Сообщите, если заметили неточности.

Вы можете отметить интересные фрагменты текста, которые будут доступны по уникальной ссылке в адресной строке браузера.