СТРУКТУРНЫЕ ПЕРЕХОДЫ ЛЮЦИФЕРАЗЫ PHOTOBACTERIUMLEIOGNATHI, ОПРЕДЕЛЕННЫЕ РАЗЛИЧНЫМИ ОПТИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ ПРИ ДЕНАТУРАЦИИ МОЧЕВИНОЙ

Тип публикации: статья из журнала

Год издания: 2018

Идентификатор DOI: 10.7868/S0041377118100181

Ключевые слова: бактериальная люцифераза, денатурация, промежуточные состояния белка, время жизни флуоресценции белка, круговой дихроизм, bacterial luciferase, denaturation, Protein intermediate states, Protein fluorescence lifetime, circular dichroism, Bacterial luciferase, Circular dichroism, Denaturation, Protein fluorescence lifetime, Protein intermediate states

Аннотация: Целью работы являлось выявление конформационных переходов люциферазы бактерий Photobacterium leiognathi в ходе равновесной денатурации мочевиной несколькими оптическими методами, включая круговой дихроизм, стационарную и время-разрешенную флуоресценцию. Были проанализированы центр тяжести и отношение интенсивностей /325/I39o для спектров флуоресценции, молярная эллиптичность при 222 нм и времена жизни флуоресценции белка. Зависимости оптических параметров от концентрации мочевины выявили два возможных перехода при денатурации люциферазы P. leiognathi - с серединами около 0.5-1.1 и 3.5-4.2 М мочевины. При этом изменение значений двух времен жизни, характеризующих флуоресценцию люциферазы, отражает оба перехода, в то время как параметры стационарной флуоресценции (центр тяжести спектра и отношение 7325/7390) - только второй из них. Спектры кругового дихроизма люциферазы P. leiognathi показали переход с серединой при 4.2 М мочевины. Проведено сравнение характеристик конформационных переходов люциферазы P. leiognathi и ранее изученной люциферазы Vibrio harveyi (Inlow et al., 2002). Поскольку, по опубликованным данным, для V. harveyi середина второго конформационного перехода лежит около 2.5 М мочевины, полученные результаты указывают на более стабильную структуру исследованной в данной работе люциферазы P. leiognathi. Наблюдаемые различия во флуоресцентных характеристиках двух высокогомологичных люцифераз при денатурации объяснены разницей в микроокружении триптофановых остатков с порядковыми номерами 131 и 277 на a-субъединице.

Ссылки на полный текст

Издание

Журнал: Цитология

Выпуск журнала: Т.60, 10

Номера страниц: 847-850

ISSN журнала: 00413771

Место издания: Санкт-Петербург

Издатель: Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российская академия наук"

Авторы

  • Гульнов Д.В. (Сибирский федеральный университет)
  • Немцева Е.В. (Федеральный исследовательский центр «Красноярский научный центр СО РАН»)
  • Герасимова М.А. (Сибирский федеральный университет)
  • Кратасюк В.А. (Федеральный исследовательский центр «Красноярский научный центр СО РАН»)

Вхождение в базы данных

Информация о публикациях загружается с сайта службы поддержки публикационной активности СФУ. Сообщите, если заметили неточности.

Вы можете отметить интересные фрагменты текста, которые будут доступны по уникальной ссылке в адресной строке браузера.