СТРУКТУРНЫЕ ПЕРЕХОДЫ ЛЮЦИФЕРАЗЫ PHOTOBACTERIUMLEIOGNATHI, ОПРЕДЕЛЕННЫЕ РАЗЛИЧНЫМИ ОПТИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ ПРИ ДЕНАТУРАЦИИ МОЧЕВИНОЙ

Перевод названия: STRUCTURAL TRANSITIONS OF PHOTOBACTERIUM LEIOGNATHI LUCIFERASE DETERMINED BY VARIOUS OPTICAL TECHNIQUES UNDER UREA-INDUCED EQUILIBRIUM DENATURATION

Тип публикации: статья из журнала

Год издания: 2018

Идентификатор DOI: 10.7868/S0041377118100181

Ключевые слова: бактериальная люцифераза, денатурация, промежуточные состояния белка, время жизни флуоресценции белка, круговой дихроизм, bacterial luciferase, denaturation, Protein intermediate states, Protein fluorescence lifetime, circular dichroism

Аннотация: Целью работы являлось выявление конформационных переходов люциферазы бактерий Photobacterium leiognathi в ходе равновесной денатурации мочевиной несколькими оптическими методами, включая круговой дихроизм, стационарную и время-разрешенную флуоресценцию. Были проанализированы центр тяжести и отношение интенсивностей /325/I39o для спектров флуоресценции, молярная эллиптичность при 222 нм и времена жизни флуоресценции белка. Зависимости оптических параметров от концентрации мочевины выявили два возможных перехода при денатурации люциферазы P. leiognathi - с серединами около 0.5-1.1 и 3.5-4.2 М мочевины. При этом изменение значений двух времен жизни, характеризующих флуоресценцию люциферазы, отражает оба перехода, в то время как параметры стационарной флуоресценции (центр тяжести спектра и отношение 7325/7390) - только второй из них. Спектры кругового дихроизма люциферазы P. leiognathi показали переход с серединой при 4.2 М мочевины. Проведено сравнение характеристик конформационных переходов люциферазы P. leiognathi и ранее изученной люциферазы Vibrio harveyi (Inlow et al., 2002). Поскольку, по опубликованным данным, для V. harveyi середина второго конформационного перехода лежит около 2.5 М мочевины, полученные результаты указывают на более стабильную структуру исследованной в данной работе люциферазы P. leiognathi. Наблюдаемые различия во флуоресцентных характеристиках двух высокогомологичных люцифераз при денатурации объяснены разницей в микроокружении триптофановых остатков с порядковыми номерами 131 и 277 на a-субъединице.

Ссылки на полный текст

Издание

Журнал: Цитология

Выпуск журнала: Т.60, 10

Номера страниц: 847-850

ISSN журнала: 00413771

Место издания: Санкт-Петербург

Издатель: Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российская академия наук"

Авторы

  • Гульнов Д.В. (Сибирский федеральный университет)
  • Немцева Е.В. (Федеральный исследовательский центр «Красноярский научный центр СО РАН»)
  • Герасимова М.А. (Сибирский федеральный университет)
  • Кратасюк В.А. (Федеральный исследовательский центр «Красноярский научный центр СО РАН»)

Вхождение в базы данных

Информация о публикациях загружается с сайта службы поддержки публикационной активности СФУ. Сообщите, если заметили неточности.

Вы можете отметить интересные фрагменты текста, которые будут доступны по уникальной ссылке в адресной строке браузера.