Recombinant Hybrid Proteins as Biospecific Reporters for Bioluminescent Microassay

Перевод названия: Рекомбинантные гибридные белки как биоспецифические репортеры для биолюминесцентного анализа

Тип публикации: статья из журнала

Год издания: 2018

Идентификатор DOI: 10.17516/1997-1389-0059

Ключевые слова: Hybrid protein, bioluminescence, photoprotein, luciferase, immunoassay, гибридный белок, биолюминесценция, фотопротеин, люцифераза, иммуноанализ

Аннотация: Light-emitting proteins, luciferases and photoproteins, are widely used as reporters in high sensitive binding assays in vitro and in vivo. The combination of luciferase and biospecific molecule with affinity to a certain target (immunoglobulin, oligonucleotide, hapten, etc.) promotes specificity of the assay. The molecules of the kind (biospecific bioluminescent labels) are usually obtained by chemical synthesis using different commercial reagents. However, this approach cannot provide homogeneity of the product; it causes the loss (sometimes essential) of specific activity of the initial molecules. As a rule chemical binding requires a thorough verification of the reaction conditions (balance of reagents, pH and temperature of the media, reaction duration, etc.) that would decrease a negative impact of the reagents and improve the yield of conjugates. Another way to obtain combination of the kind is the creation of a hybrid protein by using genetic engineering approach. In this case a genetic construction containing, in one frame, genes coding biospecific and reporter proteins as well as sequences, coding a linker between them and sometimes auxiliary polypeptides, is created. Gene fusion approach provides easy bacterial production, hybrids homogeneity, easy purification using auxiliary polypeptides etc. The paper describes several hybrids “luciferase-biospecific polypeptide” designed in the photobiology lab of the Institute of Biophysics SB RAS, their construction, production and application in microassay as biospecific bioluminescent probes.

Ссылки на полный текст

Издание

Журнал: Журнал Сибирского федерального университета. Серия: Биология

Выпуск журнала: Т.11, 2

Номера страниц: 166-173

ISSN журнала: 19971389

Место издания: Красноярск

Издатель: Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Сибирский федеральный университет

Авторы

  • Frank Ludmila A. (Institute of Biophysics SB RAS FRC “Krasnoyarsk Science Center SB RAS”)

Вхождение в базы данных

Информация о публикациях загружается с сайта службы поддержки публикационной активности СФУ. Сообщите, если заметили неточности.

Вы можете отметить интересные фрагменты текста, которые будут доступны по уникальной ссылке в адресной строке браузера.