БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ МОНИТОРИНГ ОБЕСПЕЧИВАЕТ ВОЗМОЖНОСТЬ РЕГИСТРАЦИИ ВНУТРИКЛЕТОЧНЫХ СОБЫТИЙ В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ БЕЗ РАЗРУШЕНИЯ КЛЕТОК И ТКАНЕЙ

Перевод названия: Bioluminescence-based Real Time Monitoring of Intracellular Events without Disruption of Cells and Tissues

Тип публикации: статья из журнала

Год издания: 2017

Ключевые слова: melanoma, bioluminescent reporter, luciferase, coelenterazine, cell viability, меланома, биолюминесцентный репортер, люцифераза, целентеразин, жизнеспособность клеток

Аннотация: Секретируемые репортеры обеспечивают мониторинг внутриклеточных событий в реальном времени без разрушения клеток. Для создания клеточных линий меланомы человека с возможностью неинвазивного биолюминесцентного мониторинга метаболической активности проведено сравнение эффективности изоформ и мутантных вариантов люциферазы из Metridia longa в качестве секретируемых репортеров в клетках линии меланомы человека Mel IL. Из исследованных двух изоформ и двух делеционных мутантов секретируемой люциферазы M. longa при трансфекции клеток меланомы Mel IL наибольшую активность в среде обнаружил делеционный мутант MLM3. Установлено, что оптимизация структуры гена выбранного варианта MLM3 для экспрессии в клетках человека еще почти на порядок увеличивает уровень биолюминесцентной активности в клетках Mel IL. Стабильная клеточная линия меланомы Mel IL с конститутивной экспрессией гуманизированного репортера hMLM3 получена и охарактеризована. Линейный диапазон идентификации живых клеток по активности hMLM3 репортера составлял более трех порядков с чувствительностью детекции, достигающей 10 клеток.

Ссылки на полный текст

Издание

Журнал: Биофизика

Выпуск журнала: Т.62, 3

Номера страниц: 618-624

ISSN журнала: 00063029

Место издания: Москва

Издатель: Федеральное государственное унитарное предприятие Академический научно-издательский, производственно-полиграфический и книгораспространительский центр Наука

Авторы

Вхождение в базы данных

Информация о публикациях загружается с сайта службы поддержки публикационной активности СФУ. Сообщите, если заметили неточности.

Вы можете отметить интересные фрагменты текста, которые будут доступны по уникальной ссылке в адресной строке браузера.